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轉鐵蛋白（Transferrin，TRF、TF）又稱(chēng)運鐵蛋白，是在無(wú)脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物的生物液體中發(fā)現的糖蛋白，主要由肝臟制造，轉鐵蛋白是體內最關(guān)鍵的鐵池，它是身體鐵狀態(tài)的重要生化標志物。轉鐵蛋白由位于同源N-端和C-端的兩個(gè)葉片（Lobe）組成的一種單鏈糖蛋白。人轉鐵蛋白共含678個(gè)氨基酸殘基，等電點(diǎn)為5.9、分子量為76kD。每分子的轉鐵蛋白能攜帶2個(gè)三價(jià)鐵離子(Fe³⁺)。轉鐵蛋白與Fe³⁺的相互作用取決于pH，pH為7.4時(shí)，轉鐵蛋白與Fe³⁺高效結合，在酸性pH下兩者分離。它一共有兩個(gè)鐵離子結合位，每個(gè)結合位可以與一個(gè)鐵離子結合。在羧基端（carboxyl terminal）的結合位與鐵離子有很高的親和力，只會(huì )與鐵離子結合。在氨基端的結合位則是可以與其他離子結合，親和力高低如下：鐵>鉻>錳>鎘>鎳。三價(jià)鐵離子與轉鐵蛋白的結合需要一個(gè)陰離子的存在，通常是碳酸氫鹽。與鐵離子結合的轉鐵蛋白稱(chēng)為飽和轉鐵蛋白或全鐵轉鐵蛋白（Holo-transferrin），未與鐵離子結合的轉鐵蛋白稱(chēng)為脫鐵轉鐵蛋白（Apo-transferrin）。

轉鐵蛋白主要存在于血漿中，血漿中的轉鐵蛋白供應機體絕大部分組織的鐵，而在其不能到達的部位，由這些組織自己合成的轉鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉鐵作用，可自身合成轉鐵蛋白的其他組織和細胞還包括室管膜、少突膠質(zhì)細胞、轉移性黑色素瘤細胞系以及人乳腺癌細胞系[1]。轉鐵蛋白已在各種體液中檢測到，包括血漿、膽汁、羊水、腦脊液、淋巴和母乳。轉鐵蛋白的血漿濃度從出生起就穩定，范圍為2g/L至3g/L，該蛋白的體內半衰期為8天。轉鐵蛋白水平對于健康生長(cháng)非常重要，低于0.1g/L的水平與感染、生長(cháng)遲緩和貧血的發(fā)病率增加相關(guān)。

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? ? 鐵是幾種代謝途徑和生理過(guò)程的重要元素[1]。鐵穩態(tài)的維持至關(guān)重要，因為變化會(huì )減少或過(guò)量對人體有害。鐵對所有生物都很重要。它在DNA復制中起著(zhù)核心作用，其中一種關(guān)鍵酶是核糖核苷酸還原酶，需要鐵作為輔助因子。鐵還作為血紅素的輔助因子[2]。然而，游離鐵可能有毒，通過(guò)Fenton和Haber–Weiss反應促進(jìn)自由基形成，從而導致組織氧化損傷。游離鐵通過(guò)將氫過(guò)氧化物轉化為反應性過(guò)氧基和烷氧基而引起脂質(zhì)過(guò)氧化[3]。此外，TF促進(jìn)涉及碳水化合物醛基和蛋白質(zhì)氨基的自氧化反應，從而形成糖化產(chǎn)物。由于這些原因，鐵以氧化還原非活性形式運輸是至關(guān)重要的。因此，TF的主要作用是將鐵安全地運輸到身體周?chē)怨L(cháng)細胞。

? ? 轉鐵蛋白負責運載由消化管吸收的鐵和由紅細胞降解釋放的鐵。以三價(jià)鐵復合物（TF-Fe³⁺）的形式進(jìn)入骨髓中，供成熟紅細胞的生成。轉鐵蛋白（TF）結合鐵是通過(guò)與其受體，即Transferrin Receptor 1(TFR1)相互作用而實(shí)現的。TFR1 是一種表達于細胞表面的糖蛋白，由兩個(gè)同源二聚體的亞基通過(guò)二硫鍵連接而成。在細胞表面，TF與Fe³⁺相互作用形成全鐵-TF，并與TFR1受體結合，在細胞內吞作用下進(jìn)入核內體。在偏酸性核內體的環(huán)境中，Fe³⁺與TF分離，同時(shí)前列腺蛋白(STEAP)將Fe³⁺還原為Fe²⁺，并被二價(jià)金屬離子轉運蛋白1（DMT1）轉運到細胞質(zhì)中，然后釋放了Fe³⁺的TF與TFR1組成TF/TFR1復合物，通過(guò)胞吐作用回游到細胞表面。在細胞表面，轉鐵蛋白（TF）與受體TFR1分離，成為脫鐵-TF，然后再與Fe³⁺重新結合參與鐵循環(huán)。整個(gè)過(guò)程完成后TF和TFR1被循環(huán)利用，進(jìn)入細胞攝取鐵的下一個(gè)周期中。

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? ? 傳統的細胞培養基由基礎培養基添加胎?；蛐∨Ｑ褰M成。血清是一種含有細胞生長(cháng)所需生長(cháng)因子的補充劑。而血清制品的定義不明確的性質(zhì)對于下游研究和治療應用是不可取的，并且存在批次間差異。同時(shí)，血清可能含有細胞生長(cháng)抑制因子和毒性因子，存在潛在毒性，血清的獲取成本高。血清由于成分不完全明確，給細胞培養的標準化帶來(lái)困難，同時(shí)也給細胞表達目的產(chǎn)物純化等下游操作帶來(lái)困難。為了克服與血清相關(guān)的不一致性能，無(wú)血清培養基是絕對必要的。

? ? 細胞無(wú)血清培養基通常含有多種維生素、氨基酸、無(wú)機鹽、微量元素、激素、生長(cháng)因子以及結合轉運蛋白等，部分培養基包含動(dòng)物來(lái)源或微生物重組表達的細胞外基質(zhì)。

? ? 轉鐵蛋白對于確保足夠的細胞增殖和功能至關(guān)重要，對于絕大部分細胞系在無(wú)血清培養基中生長(cháng)是必需的，為絕大多數無(wú)血清培養基必需添加物組分，通過(guò)與轉鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TFR) 相互作用，在無(wú)血清細胞培養過(guò)程中發(fā)揮重要功能。轉鐵蛋白能與三價(jià)鐵離子可逆性結合，調節鐵離子轉運及代謝，維持細胞內的鐵以及鉻、錳、鎘、鎳等多種金屬離子的平衡穩態(tài)?？删S持細胞的生長(cháng)和增殖，有類(lèi)似于生長(cháng)因子的功能。而且，轉鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑，可以避免細胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生，防止細胞受到傷害。

? ? 總而言之，轉鐵蛋白是無(wú)血清培養體系中的重要成分，研究表明飽和鐵形態(tài)的轉鐵蛋白對于促進(jìn)細胞生長(cháng)是最有效的形態(tài)。對于雜交瘤，黏連細胞和懸浮細胞系，在細胞培養過(guò)程中，應保持培養基中轉鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針對不同的細胞系，需要選擇最合適的濃度。

禾創(chuàng )^TMOsrhTF是一種來(lái)源于水稻胚乳細胞的重組人轉鐵蛋白，主要用于細胞培養。與天然提取來(lái)源的轉鐵蛋白相比，禾創(chuàng )^TMOsrhTF避免了來(lái)自于人源或動(dòng)物源病毒及支原體污染的風(fēng)險。產(chǎn)品詳情點(diǎn)擊鏈接

規格參數

來(lái)源：水稻種子

外觀(guān)：粉紅色至紅褐色或橘紅色粉末或晶體粉末

純度：≥95%（RP-HPLC）

pH值：6.0~8.0

內毒素：≤1EU/mg

分子量：75kD

鐵飽和度：70%

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主要優(yōu)勢

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應用案例

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圖1：與其他市售rhTF相比，在低血清測試體系下，禾創(chuàng )具有更佳的生物學(xué)活性

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圖2：禾創(chuàng )（右）和其他市售rhTF（左）在MSC細胞無(wú)血清培養的細胞形態(tài)對比

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圖3：與未添加TF相比，禾創(chuàng )能明顯促進(jìn)細胞增殖，并且與其他市售rhTF相比，增殖效果相當。

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無(wú)血清細胞培養系列產(chǎn)品

OsrHSA——水稻重組人血清白蛋白

OsrhFN——水稻重組人纖維連接蛋白

OsrhbFGF——水稻重組人堿性成纖維細胞生長(cháng)因子

OsrhVEGF——水稻重組人血管內皮生長(cháng)因子

OsrhKGF——水稻重組人角質(zhì)細胞生長(cháng)因子

rhIGF-1 LR3——重組人類(lèi)胰島素生長(cháng)因子-1 LR3

rhEGF——重組人表皮生長(cháng)因子

1. Gomme PT, McCann KB, Bertolini J. Transferrin: structure, function and potential therapeutic actions. Drug Discov Today 2005;10:267-273.

2. Li H, Qian ZM. Transferrin/transferrin receptor-mediated drug delivery. Med Res Rev 2002;22:225-250.

3. Rice-Evans C, Green E, Paganga G, Cooper C, Wrigglesworth J. Oxidised low density lipoproteins induce iron release from activated myoglobin. FEBS Lett 1993;326:177-182.

4. Devireddy LR, Myers M, Screven R, Liu Z, Boxer L. A serum-free medium formulation efficiently supports isolation and propagation of canine adipose-derived mesenchymal stem/stromal cells. PLoS One 2019;14:e0210250.